Stressantwort von Mikroorganismen

{"ID":4005768,"post_title":"Stressantwort von Mikroorganismen","title":"Stressantwort von Mikroorganismen","post_content":"Die Untersuchung der zellul\u00e4ren Stressantwort wird auf mehreren Ebenen durchgef\u00fchrt, wozu die Genom-, Proteom- als auch die Metabolomebene geh\u00f6hren. Die Metabolom-ebene liefert dabei einen Einblick \u00fcber die Vorg\u00e4nge in den Zellen und zwar \u00fcber die Art und Weise wie die metabolischen Fl\u00fcsse in der Zelle umgeleitet werden um auf einen \u00e4usseren Faktor zu reagieren. Das Wissen \u00fcber diese Zellantwort hilft gr\u00f6ssere Zusammenh\u00e4nge in den Zellen zu verstehen und f\u00fcr eine gezielte Ver\u00e4nderung der Mikroorganismen einzusetzen, z. B. f\u00fcr eine verbesserte Proteinproduktion. Die Untersuchung der intrazellul\u00e4ren Metabolite in den Zellen zu einem bestimmten Zeitpunkt der Kultivierung bedarf eines raschen Abstoppens der zellul\u00e4ren Vorg\u00e4nge. Dazu werden im Allgemeinen kalte L\u00f6sungen, sog. Quenchingl\u00f6sungen, zumeist basierend auf dem organischen L\u00f6sungsmittel Methanol, herangezogen. Der Abstoppprozess (engl. quenching) f\u00fchrt in allen bisher untersuchten F\u00e4llen zum Verlust von intrazellul\u00e4ren Metaboliten wie ATP. Die Auswirkung der L\u00f6sungen auf die Integrit\u00e4t der Zellen wurden in der vorgelegten Arbeit untersucht. Als Organismen wurden Escherichia coli und Saccharomyces cerevisiae eingesetzt. Untersucht wurden sowohl die Auswirkungen von unterschiedlichen Starttemperaturen der Abstoppl\u00f6sung als auch die Wirkung von verschiedenen Zusammensetzungen. Etabliert und eingesetzt wurde dazu die Durchflusszytometrie zur Bestimmung der besch\u00e4digten Zellpopulationsanteile, der Vergleich der optischen Dichte vor und nach der Behandlung (Indikator f\u00fcr Zellyse), sowie die Bestimmung eines repr\u00e4sentativen Metabolits (ATP) in Abstoppl\u00f6sungs\u00fcberstand und Zellextrakt. Mit der Abstoppl\u00f6sung die den geringsten Effekt auf die Zellen hat, wurde anschliessend die Langzeitstressantwort von S. cerevisiae und einiger ausgew\u00e4hlter Knockoutmutanten (mae1?; zwf1?) untersucht. Die Kultivierung erfolgte in Sch\u00fcttelkolben, wobei das Minimalmedium mit den ausgew\u00e4hlten Stressfaktoren Diamid (oxidativer Stress) oder Koffein versetzt wurde. \u00dcber Metabolic Profiling wurden die Zellextrakte mittels GC-MS analysiert. Dabei stellte sich heraus, dass Diamid in der eingesetzten Konzentration keinen Langzeiteffekt auf den Zellmetabolismus hatte. Jedoch st\u00f6rte Koffein die Zellen stark, was sich in einem deutlich verminderten Zellwachstum, ver\u00e4nderten Aminos\u00e4ure- und geringeren Fetts\u00e4urekonzentrationen, sowie in der Produktion von kompatiblen Soluten \u00e4usserte. F\u00fcr die Untersuchung der dynamischen Stressantwort (d. h. Aufgabe eines Pulses) wurde ein automatisiertes Probenentnahmesystem f\u00fcr Glasreaktoren entwickelt (rapid sampling), mit dem Ziel, bei kontinuierlich betriebenem Bioreaktreaktor eingesetzt zu werden. Das System erm\u00f6glicht die Unterteilung eines kontinuierlichen Probenflusses in einzelne Proben, die jeweils eine Zeitspanne von ca. 143 ms abdecken.","image":"https:\/\/images.thalia.media\/00\/-\/dc9077f202654a7caf0ede7ad0e3a008\/stressantwort-von-mikroorganismen-taschenbuch-friederike-schaedel.jpeg","url":"https:\/\/www.vergleiche.ch\/unterhaltung\/product\/stressantwort-von-mikroorganismen\/","min_price":36.89999999999999857891452847979962825775146484375,"low_price_merchant_id":70254503,"deeplink":"https:\/\/www.awin1.com\/pclick.php?p=40993210963&a=401125&m=13971&pref1=9783869557465","ean":9783869557465,"brand":"undefined"}